La Basílica de Nuestra Señora de Guanajuato es la catedral principal de la ciudad, construida entre 1671 y 1696. Alberga una talla de madera de la Virgen adornada con joyas que, según se dice, data del siglo VII, lo que la convierte en la pieza de arte cristiano más antigua de México. La catedral está dedicada a la patrona y protectora de la ciudad. El edificio cuenta con un órgano de tubos barroco francés de 1.098 tubos.